След използване на водороден пероксид (особено изпарен водороден пероксид VHP) за дезинфекция и стерилизация в шкафове за биобезопасност, строгият и научен мониторинг и проверката на резултатите са единственият начин да се потвърди ефективността на стерилизацията, както и основните изисквания за контрол на качеството и съответствие с нормативните изисквания. Това не е просто процес на „пускане на устройството“, а затворен-процес, който изисква множество физически, химични и биологични доказателства.
Следва систематичен анализ на техниките за мониторинг и валидиране.
Основен принцип: Система за тройна проверка
Цялостното валидиране трябва да включва „мониторинг на параметрите на процеса“, „химични индикатори“ и „тестване за предизвикване на биологични индикатори“, като всички те се допълват взаимно и са незаменими.
Наблюдение на параметрите на процеса (-наблюдение в реално време, за да се гарантира, че условията отговарят на стандартите)
Това е първата защитна линия за проверка, която включва-запис в реално време на ключови физични и химични параметри чрез сензори на устройството, доказващи, че цикълът на стерилизация работи в рамките на зададения и ефективен диапазон на параметрите.
Параметри за наблюдение:
Концентрация на парите на водороден пероксид (ppm): най-критичният параметър. Тя трябва да бъде постигната и поддържана при предварително определената целева концентрация (напр. стотици ppm) за достатъчен период от време. Ниската концентрация може да доведе до неуспешна стерилизация.
Относителна влажност (% RH): контролирана на ниско ниво (обикновено<40%) to ensure that VHP is in an efficient "micro condensation" state rather than large droplet condensation. Excessive humidity can dilute disinfectants and may damage equipment.
Температура: Следете температурата на камерата, която влияе върху налягането на наситените пари и процеса на кондензация.
Налягане/въздушен поток: Уверете се, че камерата е запечатана и циркулацията на газа е нормална.
Време на експозиция: Продължителността, поддържана при целевата концентрация.
Как да изпълним:
Автоматично се допълва от сензорите и системата за управление, вградени във VHP генератора.
Ключово изискване: Оборудването трябва да може да генерира и съхранява пълни графики с циклични данни (крива на концентрацията време, крива на температурата и влажността), които трябва да бъдат включени като част от доклада за валидиране. Всяко отклонение на параметър от предварително зададения диапазон трябва да доведе до аларма или прекъсване на цикъла.
Химически индикатори (качествени/полуколичествени, визуални резултати-в реално време)
Използва се за бързо и интуитивно определяне дали даден артикул е изложен на среда за стерилизация с водороден пероксид и може косвено да отразява дали дозата е достатъчна.
Тип и принцип:
Химическа индикаторна карта тип етикет: Съдържа багрила, чувствителни към водороден пероксид. Когато се натрупа достатъчно количество доза водороден прекис (концентрация х време), настъпват необратими промени от един цвят в друг.
Място на поставяне: Трябва да се постави на най-трудно достъпното място за стерилизация, като например:
Най-дълбокият ъгъл на безопасното работно пространство на шкафа.
Вътре в дренажния канал.
Съединението между филтъра и монтажната рамка (ако е възможно).
Вътрешна изпускателна тръба (ако е покрита с дезинфекция).
Функция и ограничения:
Функция: Осигурява незабавни резултати за бързо освобождаване; Потвърдете, че парата е разпределена до определеното място; Като идентификатор за разграничаване между „обработени“ и „необработени“ елементи.
Ограничения: Може да докаже само експозиция, не може да докаже стерилност. Промяната на цвета само показва, че е достигнат прагът на минималната доза, но не гарантира унищожаването на всички микроорганизми.
Провокационен тест за биологичен индикатор (количествен, доказателство за крайна ефективност)
Това е златният стандарт за проверка и решаващи доказателства. Чрез използване на стандартизирани микробни спори с известна висока устойчивост е директно доказано, че процесът на стерилизация е достатъчен, за да убие най-трудните за убиване микроорганизми.
Избор на биологични индикатори:
Стандартен щам: Спори на Geobacillus stearothermophilus. Това е международно признатата стандартна тестова бактерия с най-силна устойчивост на водороден пероксид.
Форма на носител: обикновено оцветена с капчици спорова суспензия хартиена лента, лист от неръждаема стомана или инсталирана върху специфичен носител.
Известен брой спори: Всеки биологичен индикатор съдържа известен брой спори, обикновено 10 ^ 5 до 10 ^ 6 CFU (единици, образуващи колонии).
Стратегия за поставяне (най-критичната стъпка):
Местоположение: Трябва да се постави в „най-студената точка“, където стерилизацията е най-трудна или където газът прониква най-трудно. За шкафове за биобезопасност препоръчителните места включват:
Под работната маса, в ъгъла близо до предната решетка.
Връзката между задната стена и работната маса.
На гърба или в процепи на вътрешни инструменти, като например държачи за пипети.
Ако обхватът на проверката включва вътрешността на изпускателния клапан или тръбопровода.
Количество: Използвайте най-малко 3 биологични индикатора и включете една нетретирана положителна контрола.
Процес на тестване и тълкуване:
Експозиция: Извършете пълен VHP цикъл на стерилизация с BI шкафа.
Рециклиране и култивиране:
След като цикълът приключи, отстранете BI при стерилни условия.
Поставете го в специална епруветка за възстановяване, съдържаща хранителна среда.
Култивирайте в инкубатор 56-60 градуса C за 24-48 часа (конкретно време според инструкциите).
Едновременно култивирайте положителна контрола (нестерилизирана) и отрицателна контрола (стерилна хранителна среда).
Тълкуване на резултата:
Проверката е успешна: Всички стерилизирани BI културни среди остават прозрачни (без обезцветяване/мътност), което показва липса на оцеляване на спорите. Положителната контрола трябва да показва активен растеж (пожълтяване/мътност на хранителната среда), а отрицателната контрола трябва да остане чиста.
Неуспешна проверка: Всеки обработен BI, показващ растеж (пожълтяване/мътност), показва неуспех на цикъла на стерилизация. Необходимо е да се проучат задълбочено причините (като грешки в параметрите, разположение, неизправности на оборудването, проблеми с уплътняването и т.н.), да се коригира планът и да се извърши отново пълна проверка.
Цикъл и тип на проверка
Първа проверка:
След инсталирането на VHP оборудването или първоначалната стерилизация на нов тип предпазен шкаф трябва да се извърши.
Това е най-изчерпателната проверка, която изисква определяне на „най-студената точка“ и установяване на ефективни параметри на контура.
Редовна презаверка:
Обикновено се провежда на всеки шест месеца или годишно.
Използва се за потвърждаване на съответствието на оборудването, програмите и операторите.
Ежедневно наблюдение:
Химическите индикатори трябва да се използват за всеки цикъл на стерилизация и картите на параметрите на процеса трябва да се преразглеждат.
Честотата на тестване на биологичен индикатор може да бъде намалена според случая (като месечно или тримесечно), но зони със строги разпоредби може да изискват използването на всяка партида/цикъл.
Документиране на записи и отчети (доказателство за съответствие)
Всички дейности по наблюдение и проверка трябва да бъдат официално документирани и докладът трябва да включва най-малко:
Информация за оборудването: модел и номер на VHP генератора.
Информация за целевото устройство: модел на шкаф за биобезопасност, номер, местоположение.
Параметри на цикъла: задайте целева концентрация, време, температура и влажност и др.
Графика на данните за процеса: крива на концентрацията време на действителната работа и др.
Химически показатели: вид, партиден номер, място на поставяне, резултати от промяна на цвета (с приложени снимки).
Биологични показатели: щам, партиден номер, количество спори, място на поставяне, резултати от посявка (приложени снимки на епруветката с култура).
Заключение: Определете ясно дали цикълът на стерилизация е ефективен.
Изпълнител и дата: Подпис на оператор и рецензент.
резюме
Нестерилизираната стерилизация е еквивалентна на липса на стерилизация.
Надеждна система за валидиране за дезинфекция с водороден прекис и стерилизация на шкафове за биобезопасност е:
Осигурете контрол на процеса чрез „картографиране на параметри на процеса“, постигнете бързо визуално освобождаване чрез „химични индикатори“ и в крайна сметка получете сертификат за крайна микробиологична ефективност чрез „тест за предизвикателство на биологичен индикатор“.
Тази тройна система за валидиране е ключът към издигането на дезинфекцията с водороден прекис от „операция“ до проследима, възпроизводима и надеждна „наука“ и също е крайъгълният камък за постигане на изискванията на GLP, GMP и акредитация на лаборатории за биобезопасност у дома и в чужбина. Ръководителите на лабораториите трябва да прилагат това като задължителна процедура и да я наблюдават непрекъснато.
